細(xì)胞離心機(jī)離心分離純化法可以避免二次污染
細(xì)胞離心機(jī)通過(guò)離心技術(shù)使得細(xì)胞分離,是一種物質(zhì)分離,不通過(guò)介質(zhì),就不出現(xiàn)二次污染。
細(xì)胞離心機(jī)采用的就是離心分離純化法:
離心方法,包括差速離心法和密度梯度離心法,密度梯度離心法又分為速度-區(qū)帶密度梯度離心法和等密度梯度離心法。在選用合理的方法對(duì)細(xì)胞或組織進(jìn)行破碎后,首先要進(jìn)行差速離心法,即根據(jù)不同離心速度所產(chǎn)生的不同離心力將各種細(xì)胞組分和顆粒分離開(kāi)來(lái)。各種細(xì)胞器和顆粒典型的差速離心順序見(jiàn)下表。
細(xì)胞離心機(jī)是利用離心力對(duì)混合液(含有固形物)進(jìn)行分離和沉淀的一種專(zhuān)用儀器。細(xì)胞離心機(jī)有低速、高速離心機(jī)和低速、細(xì)胞離心機(jī),以及超速分析、制備兩用冷凍離心機(jī)等多種型號(hào)。而細(xì)胞離心機(jī)是帶制冷系統(tǒng)的高速離心機(jī)。這種離心機(jī)的離心腔溫度通??山抵亮銛z氏度以下。轉(zhuǎn)速可達(dá)10000rpm以上,具有冷凍離心機(jī)的性能和結(jié)構(gòu)外,細(xì)胞離心機(jī)所用角式轉(zhuǎn)頭多采用用鈦合金或鋁合金制成。離心管為具蓋聚乙烯硬塑料制品。這類(lèi)離心機(jī)多用于收集微生物、細(xì)胞碎片、細(xì)胞、大的細(xì)胞器、硫酸沉淀物以及免疫沉淀物等。那么,操作細(xì)胞離心機(jī)需要重點(diǎn)關(guān)注的問(wèn)題有哪些呢?
操作細(xì)胞離心機(jī)需要注意的事項(xiàng):
1.離心管內(nèi)裝載的溶液量必須合適,不銹鋼管無(wú)蓋,只能裝2/3,塑料管可裝至肩部。管蓋必須蓋嚴(yán)絕不允許漏液??展茈x心會(huì)變形。塑料管使用有機(jī)溶劑必須符合規(guī)定。
2.離心管必須成對(duì)放置,必須嚴(yán)格平衡,偏差<0.1g。
3.不允許無(wú)轉(zhuǎn)頭空轉(zhuǎn),放取轉(zhuǎn)頭必須用手柄,以防轉(zhuǎn)頭滑落。轉(zhuǎn)頭要輕放、卡穩(wěn),旋下手柄時(shí)要用手扶住手柄只轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)頭。轉(zhuǎn)頭蓋要蓋嚴(yán),無(wú)蓋不準(zhǔn)離心。
4.細(xì)胞離心機(jī)離心時(shí)不準(zhǔn)打開(kāi)機(jī)蓋,不準(zhǔn)扒扶在離心機(jī)上,如有異常聲音和振動(dòng)時(shí)立即停機(jī)。
5.轉(zhuǎn)頭使用后必須及時(shí)由轉(zhuǎn)頭室中取出、擦干,用擦孔棒將管孔仔細(xì)擦凈。如有溶液溢出必須清洗干凈,擦凈轉(zhuǎn)頭室內(nèi)凝水,開(kāi)門(mén)涼干轉(zhuǎn)頭室。
6.使用離心機(jī)必須預(yù)約,用后必須登記。
7.未經(jīng)過(guò)培訓(xùn)和考核者不能使用。
8.選擇合適的轉(zhuǎn)頭和轉(zhuǎn)速,絕不可超速使用。
9.選擇合適的溫度,通常4℃,除有機(jī)溶劑外不要低于零下,以免冰凍,損壞離心管和轉(zhuǎn)頭。
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